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聚乙二醇分子量分布測定方法

最近在瀏覽國家藥典委員會官網的時候,驚奇的發現聚乙二醇300,400,1000……全部的聚乙二醇品種藥典方法都要修訂了!在瀏覽了公示方法,發現原來是新增了一個項目,從2020版藥典開始要標明重均分子量及分子量分布系數的標示值(按所附測定方法測定),那各位小伙伴了解分子量及分子量分布測定方法嗎?這里就給大家詳細講講。

2020版中國藥典征求意見稿之分子量及分子量分布測定方法

分別稱取聚乙二醇600、聚乙二醇1000、聚乙二醇4000、聚乙二醇7000、聚乙二醇10000分子量對照品適量,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液作為對照品溶液。稱取樣品適量,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液作為供試品溶液。照分子排阻色譜法(通則0514)測定,采用適宜分離范圍的凝膠色譜柱,以0.1mol/L硝酸鈉溶液(含0.02%抑菌劑)為流動相,示差折光檢測器;檢測器溫度35℃,柱溫35℃,取對照品溶液各100μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖,由GPC軟件計算回歸方程,線性相關系數R應不得小于0.99。取供試品溶液100μl,同法測定,根據回歸方程計算供試品的重均分子量及分子量分布。供試品的重均分子量應為標示值的90%~110%,分布系數應為產品標示值的90%~110%。

什么是分子排阻色譜法

分子排阻色譜法是根據待測組分的分子大小進行分離的一種液相色譜技術。分子排阻色譜法的分離原理為凝膠色譜柱的分子篩機制。色譜柱多以親水硅膠、凝膠或經過修飾的凝膠如葡聚糖凝膠(Sephadex)和瓊脂糖凝膠(Sepharose)等為填充劑,這些填充劑表面分布著不同孔徑尺寸的孔,藥物分子進入色譜柱后,它們中的不同組分按其分子大小進入相應的孔內,大于所有孔徑的分子不能進入填充劑顆粒內部,在色譜過程中不被保留,最早被流動相洗脫至柱外,表現為保留時間較短;小于所有孔徑的分子能自由進入填充劑表面的所有孔徑,在色譜柱中滯留時間較長,表現為保留時間較長;其余分子則按分子大小依次被洗脫。


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